以p53-MDM2为靶点开发全新机制的抗肿瘤药物，是当前抗肿瘤药物研发领域的重点。目前基于p53-MDM2靶点尚未有上市药物，其面临的主要问题是🕵🏿♂️：MDM2被抑制后🧑🏼🤝🧑🏼，细胞受负反馈调节会使MDM2蛋白上调，因此需要更高浓度的抑制剂来达到原先抑制水平，而高浓度抑制剂会引起毒副作用👨🏽🦲，包括嗜中性粒细胞减少症、热性嗜中性粒细胞减少症✥、长期细胞减少症👩🏿🎨、骨髓衰竭和胃肠毒性等。因此，需要研发更有效的p53-MDM2阻断分子来克服上述问题🤦🏼♂️。
蛋白降解靶向嵌合体（Proteolysis targeting chimera, PROTAC）是当前新兴的抗肿瘤药物研发技术，具有低剂量高效降解靶蛋白的优势🏌️🐌。然而，PROTAC除了结合目标蛋白之外通常会引入第二靶点—E3泛素连接酶〰️，当结合E3泛素连接酶时可能对第二靶点蛋白产生抑制作用或脱靶效应，从而引起相关毒副作用🧏🏻♂️。有研究显示⇒，利用含CRBN的E3配体设计的PROTAC除了降解目标蛋白外，还可同时降解其它蛋白导致脱靶效应等。同型PROTAC是PROTAC技术的一种新形式🧜🏼♂️，由两个相同配体分子直接连接而成，即E3连接酶配体（靶蛋白配体）以二聚化形式存在以介导其自身结合蛋白的降解🧑🏻🤝🧑🏻。与传统PROTAC分子相比🧃，同型PROTAC的优势在于不引入第二靶点，可有效避免潜在的毒副作用。MDM2蛋白既是靶蛋白也是E3泛素连接酶，为同型PROTAC的设计提供了理论依据🤟。
在前期设计的新型p53-MDM2/HDAC双靶点抑制剂（J. Med. Chem., 2018, 61, 16，7245-7260）研究工作基础上，意昂4何世鹏副研究员联合美国University of Arizona王卫教授成功设计了第一代MDM2蛋白Homo-PROTAC降解分子。当同型PROTAC结合MDM2蛋白时，一端配体连接的MDM2发挥E3泛素连接酶作用，给另一端的MDM2蛋白贴上泛素化“标签”🫕，诱导MDM2蛋白进行“自杀式”降解，并上调p53蛋白。
图1. Homo-PROTAC设计思路
生物活性结果显示，化合物11a对MDM2（Ki = 96 nM）竞争性抑制活性最强👌🏽，并且对人肺癌A549细胞表现出较强的抑制活性。通过Western Blot实验在细胞水平上验证了该化合物通过蛋白酶体途径降解MDM2蛋白，上调p53蛋白🧑，并引起A549肿瘤细胞凋亡。将11a进行手性拆分🍨🦸🏽♀️，得到的光学纯化合物11a-1显示出更为高效的MDM2蛋白降解活性。体内裸鼠A549移植瘤实验结果表明，化合物11a-1在腹腔注射给药剂量20 mg/kg下抑瘤率为45.6%，该化合物具有明确的量效关系🏍，当腹腔注射给药剂量提高至30 mg/kg时，其抑瘤率达到52.4%，实验动物体重无明显变化💂🏼♀️。药代动力学实验表明，11a-1具有较为合理的半衰期和血药浓度时下分布曲线值（AUC），是一种具有具有良好PK/PD性能的新型PROTAC分子，目前进一步的结构优化研究正在进行中。
